聚众斗殴罪与故意伤害罪二者区别的根本标志在于犯罪动机。聚众斗殴罪中的伤害行为，虽然与故意伤害行为一样，都侵犯了他人身体健康，但是它有一个显著的特点，即在伤害行为中，通常表现为为了称王称霸，充英雄好汉而惹事生非，与对方争个高低。所以，凡是为了争霸“势力范围”，或者明确表示要打服对方，而行凶伤人的都是聚众斗殴中的伤人行为。
而故意伤害罪中的伤害行为，则往往是对自已或自己一方所认识的人，由于宿仇旧恨而起意伤害对方，它在事先具有明确的伤害对象和伤害故意;如果是临时起意伤害对方，也往往是因为双方发生纠纷的原因明显的在对方一边，或者在互殴中伤害他人，这种情况往往是双方都有过错，责任不易分清。
当然，刑法第二百九十二条第2款明文规定：“聚众斗殴，致人重伤、死亡的，依照本法第二百三十四条、第二百三十二条的规定定罪处罚。”这说明在聚众斗殴活动中，一旦造成他人重伤、死亡的，一律按故意伤害罪、故意杀人罪定罪处罚。这是对犯罪的一种转化型规定。
二、聚众斗殴要具备什么条件
(1)犯罪主体是聚众斗殴的首要分子和其他积极参加的人;
(2)行为人实施了聚众斗殴的行为。
聚众斗殴罪主要是对于首要分子，应对其组织、策划、指挥的全部犯罪进行处罚;对于积极参加者，应按照其参与的犯罪进行处罚。
尾随、被胁迫参与斗殴，且在聚众斗殴过程中作用不大，情节显著轻微，危害不大，不作为犯罪处理。
在聚众斗殴和故意伤害均造成轻伤的情况下，二者之间的界限比较模糊，需要结合具体案情特别是行为人的主观方面要件准确判断;不过，如果聚众斗殴致人重伤、死亡的，根据法律规定，则应当依照故意伤害罪的规定定罪处罚。
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